领衔主演：
冯长海（上海枫林医药医学检验有限公司）
片名：
初识霉菌及图片制作
放映时间：
年12月15日晚20:00
特邀嘉宾：
陈知行（医院）
王澎（医院）
钱雪琴（复旦大学附属上海公共卫生临床中心）
金牌主持：
陈杏春（医院）
范齐文（医院）
冯唐不老守初心，
长歌一曲万人聆。
海藏滴水显微界，
道传千家公益行。
1、请问老师，做真菌是否是需要专门的生物安全柜，不能与细菌通用？
答：原则上不能，避免污染。
2、请问冯老师，在鉴定丝状真菌时主要是靠形态吗？如果形态不典型，如何用分子的方法鉴定，是通用引物然后测序吗？另外，现在盛行的质谱在鉴定丝状真菌上可以吗？谢谢！
答：形态学鉴定是目前较常用的方法，但其存在缺陷，如不同菌种间的霉菌形态差异有时不明显，霉菌形态上相似但遗传学上相差较大等，故又出现了许多霉菌新方法。分子生物学鉴定的方法较多，测序只是其中之一，祥见下图。质谱鉴定丝状真菌理论上是可以的，但目前质谱的数据库估计还需要加强。
3、请问一下冯老师，醇～甘油～棉蓝的比例是多少
答：2：3：5
最好现配现用。放久后染色时会出现画面背景模糊现象。
4、SDA与SGC有区别吗？
答：SDA为SabouraudDextroseAgar,即沙氏葡萄糖琼脂培养基，SGC为SabouraudGentamicinChloramphenicol,即沙氏庆大霉素-氯霉素培养基，前者无抗生素，后者有。
5、请问制作小培养的培养基厚度多少？
答：目前正在做这项工作。
6、感谢老师为课件花费数月时间准备课件！好多图片，好细致，还教我们简单易成的方法来拍照！1、请问最后一个纸盒拍平板的工具，是为了排除反光，那怎样把握光线明暗呢，光靠盒子两侧挡板调节吗？2、看有同仁用亚甲兰染霉后的颜色跟棉兰很像，请问能替代吗？3、下图左边是没染色的效果吗？那些泡泡是什么呀？
答：光源和平板的位置更为重要，通过小孔观察到平板光影均一，成像清晰即可，两边的小板属微调。目前国内有公司在研发这种设备，成像清晰、携带方便，应该会很快上市。
亚甲兰染色效果不如棉兰，我所说的棉兰是乳酸酚棉兰，因苯酚具杀菌作用，有生物安全作用，亚甲兰应无此作用。
是刚染色的效果，泡泡是气泡。
7、请问冯老师：丝状真菌的生物安全如何防护？生物安全柜内紫外线可以吗？
答：请阅读《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》、《实验室内生物安全通用要求》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《人间传染的病原微生物名录》，上有论述。
紫外线杀不了霉菌
8、痰标本培养出曲霉菌，我们只报种不报药敏就行了吗？
答：报到种是极高的要求，如曲霉近个种，形态学鉴定不可能做到，能报到组就已经是很高的水平了。
曲霉目前好象没有药敏判读标准，做药敏实验可能会出现污染环境，不易清除。做不做药敏试验需和贵院临床医生沟通。
9、请教冯老师：真菌培养箱消毒周期及如何消毒？
答：消毒周期限需根据您的标本量及污染程度制定。一般至少1个月一次。
薰蒸。乳酸或高锰酸钾+甲醛薰蒸。
10、请问冯老师，如果在安全柜外的台面被真菌孢子污染了，如何消毒呢？
答：先用纸巾覆盖，上用5%石炭酸或0.5%过氧乙酸浸润，浸泡数分钟后，清洁台面。最后，空气薰蒸。
11、请问冯老师，你的小培养的培养基是什么名称？真菌培养间的日常消毒怎么做？
答：PDA。
用5%石炭酸或0.5%过氧乙酸清洁台面，定期薰蒸。
12、冯老师，您好。您用这个小培养方法，虽然有给它提供到一定的湿度，但培养了7天或者14天，那么小的琼脂块不会干掉吗？
答：会。但一般7天内典型结构已经出现。
13、请问冯老师，真菌孢子容易污染房间，老师是怎样做好个人防护的?
答：口罩、手套必带，隔离衣必穿；操作时小心，出现意外时及时处理；工作完成后进行消毒，根据需要空气薰蒸。
14、各位老师，我们用梅里艾的MH琼脂做AtccKB法庆大霉素和阿米卡星，抑菌圈总是较小，是什么原因呢？
答：更换菌种试试，如正常，说明菌已变异；如仍小，用ATCC或ATCC菌种检测庆大和丁卡，同时加用四环素纸片：如抑菌圈全小，是MH出现问题；如庆大和丁卡仍小，四环素在控，换纸片。CLSIM有解决方案。
15、有没有多种曲霉感染的情况，比如同时存在黄曲和烟曲
答：理论上存在。您可以查下文献。
16、加表面活性剂可以去气泡吗
答：去气泡的目的是在不影响画面背景的前题下，使画面完整、清晰。不能为去气泡而去气泡。表面活性剂种类繁多，您指的是哪种？也可自己尝试一下。有结论后请向大家回复一下。
17、感觉钢圈法安全请问可以哪里买？
答：钢圈目前市面上没有销售，都是我们去订做的，具体尺寸见下图。辉瑞公司为了推广真菌的检测技术，在我们这里订做了几千个，如需要可以问当地的辉瑞公司销售人员。
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